Інгібітор активатора плазміногену
ТАП безперервно секретується ендотелієм як активний фермент, але в крові він швидко інактивується. Найбільш ефективний інгібітор ТАП і урокінази – білок з сімейства серпінов, що отримав назву інгібітора активаторів Пг типу 1 (ІАП-1). Інгібітор активаторів Пг типу 2 (ІАП-2), инактивирующий з високою швидкістю урокиназу, синтезується плацентою, моноцитами і макрофагами. У нормі в крові він не виявляється, але при вагітності та ряді захворювань його вміст у плазмі може значно зростати. Інгібітори, спочатку описані як ІАП-3 і ІАП-4, згодом були ідентифіковані як інгібітор ПрСа і протеазний нексін-I відповідно.
ІАП-1 – глікопротеїн з молекулярною масою 52 кД, що складається з 379 амінокислотних залишків. Основне місце синтезу ІАП-1 – ендотелій судин. ІАП-1 може синтезуватися також гепатоцитами, моноцитами, фібробластами, клітинами меланоми і ГМК. Значна кількість ІАП-1 (~ 90% від загального пулу крові) міститься в α-гранулах тромбоцитів і секретується з них при активації, що може створювати високу локальну концентрацію ІАП-1 і відігравати важливу роль в стабілізації фібринової матриці тромбу.
ІАП-1 може перебувати в активній і латентної формах, перехід між якими не пов’язаний з протеолізом і звернемо. In vitro латентний ІАП-1 активується обробкою хаотропнимі реагентами. Фізіологічний механізм активації латентного ІАП-1 невідомий. Передбачається, що негативно заряджені фосфоліпіди, експонуються на поверхні активованих тромбоцитів, можуть активувати латентний ІАП-1. У плазмі активна форма ІАП-1 зв’язується з вітронектину, стабілізуючим активну конформацію ІАП-1. Вітронектину забезпечує також зв’язування ІАП-1 з позаклітинним матриксом.
Взаємодія ІАП-1 з активаторами протікає в дві стадії. Спочатку швидко (kcat ~ 107 М-1-с-1) утворюється зворотній комплекс, в якому відбувається розщеплення зв’язку Arg346-Met347 реактивного центру із звільненням С-кінцевого пептиду інгібітора і утворенням ковалентного комплексу активатор-ІАП-1. Комплекс ТАП-ІАП-1 може зв’язуватися з фібрином і бути конкурентним інгібітором взаємодії ТАП з фібрином.
Підвищення активності ІАП-1 – найбільш часто зустрічається причина зниження фібринолітичної активності крові. Аналіз співвідношення між вмістом у плазмі ТАП, його активністю та активністю ІАП-1 показав, що частка активного ТАП експоненціально знижується при лінійному збільшенні активності ІАП-1. При активності ІАП-1 менше 7 МО / мл близько 33% секретується ендотелієм ТАП знаходиться в активному стані, а при активності ІАП-1 більше 22 МО / мл на частку активного ТАП припадає лише 1,5%. Прямий доказ того, що підвищення ІАП-1 може призводити до патологічного тромбоутворення, отримано в експериментах з трансгенними мишами, у яких венозні тромбози розвивалися при підвищенні експресії гена ІАП-1 і зникали після її придушення. Гетерозиготна форма вродженого дефіциту ІАП-1 протікає безсимптомно, а у гомозигот спостерігаються повільне загоєння ран і підвищена кровоточивість після травм.
У промоторних ділянці гена ІАП-1 виявлений 4G / 5G-полі – морфізм, який впливає на швидкість транскрипції. У популяції зустрічальність генотипів 4G / 4G, 4G / 5G і 5G / 5G відповідає 0,25, 0,5 і 0,25. Рівень ІАП-1 в плазмі у 4G / 4G-гомозигот на ~ 30% вище, ніж у 5G / 5G. Активність ІАП-1 в плазмі схильна циркадного змінам протягом дня з максимумом в ранкові години і протягом року з максимумом в зимові місяці. ІАП-1 – один з компонентів системи гемостазу, що визначають ранкову гиперкоагуляцию.
ІАП-1 – один з найбільш бистрореагірующіх білків гострої фази. Його активність у плазмі може значно підвищуватися при багатьох захворюваннях. Синтез ІАП-1 стимулюється ендотоксинів, цитокінами, факторами росту, а також тромбіном, ТАП і ангиотензином II.
Дані проспективних досліджень свідчать про те, що підвищення активності ІАП-1 і / або зниження активності ТАП пов’язано з ризиком розвитку інфаркту міокарда у хворих з нестабільною стенокардією, повторного інфаркту міокарда в молодому віці і рестенозов після ангіопластики. У той же час необхідно відзначити, що при багатофакторному аналізі значимість ІАП-1 як фактора ризику знижується, що відображає його взаємозв’язок з іншими факторами ризику захворювань ССС. Рівень ІАП-1 в плазмі корелює з концентрацією інсуліну, індексом маси тіла, підвищенням рівня ТГ і зниженням вмісту ЛПВЩ, які характерні для синдрому резистентності до інсуліну.
Безпосередній вплив інсуліну на синтез ІАП-1, яке показано в експериментах з культурами клітин, – лише один з можливих механізмів, які пов’язують гиперинсулинемию з підвищенням ІАП-1 в плазмі. Інший механізм може полягати у розвитку андроидного типу ожиріння. Порівняльний аналіз синтезу ІАП-1 в зразках жирової тканини показав, що клітини сальника синтезують значно більше ІАП-1, ніж підшкірний жир. Нарешті, третій механізм може полягати у впливі інсуліну на метаболізм ЛП. В експерименті показано, що ЛПНЩ і ЛПДНЩ збільшують секрецію ІАП-1 культурою ендотеліальних клітин, причому ЛПДНЩ, виділені з плазми хворих з гіпертригліцеридемією, мають більш вираженим ефектом, ніж ЛПДНЩ донорів. Велика ефективність ЛПДНЩ хворих обумовлена більш високою спорідненістю цих частинок до клітинного рецептора.
АТ до рецептора апоВ / E усували стимулюючий вплив ЛПДНЩ на синтез ІАП-1. Окислення ЛНП підвищує їх здатність стимулювати синтез ІАП-1 ендотелієм вен.
Інсулін і ЛПДНЩ можуть діяти синергічно в стимуляції синтезу ІАП-1. Додавання фізіологічних концентрацій інсуліну або ЛПДНЩ, виділених з плазми донорів, до культури клітин HepG2 призводить до двократного збільшення рівнів ІАП-1 в культуральному середовищі і іРНК в клітинах, а при спільній дії спостерігалося 6-кратне збільшення кількості іРНК в клітинах і концентрації Аг ІАП – 1 в культуральному середовищі.
У зв’язку з тим, що в плазмі значно нижче концентрація ТАП, ніж інших протеаз і його швидкодіючого інгібітора, точне вимірювання активності ТАП в крові – методично складне завдання. Вивчення змісту ТАП за допомогою ІФА показало, що підвищення Аг ТАП дозволяє передбачати клінічні ускладнення атеросклерозу, в основі яких лежить тромбоз. У хворих на стенокардію з ангіографічно підтвердженим ураженням коронарних артерій підвищення рівня співвідношення ТАП і Аг корелювало з частотою розвитку інфаркту міокарда, інсультів і смертністю. Аналогічні результати були отримані в американському дослідженні, в якому спостерігалися практично здорові чоловіки. У великому популяційному дослідженні чинників ризику атеросклерозу підвищення співвідношення ТАП і Аг асоціювалося з появою його ранніх ознак.
У ряді досліджень були виявлені підвищення рівня Аг і ТАП у хворих з тромбозами і наявність негативної кореляції між концентрацією Аг і активністю ТАП в плазмі хворих. Передбачається, що підвищення рівня Аг і ТАП може бути обумовлено збільшенням швидкості інгібування ТАП в кровотоці і накопиченням комплексу ТАП-ІАП-1, кліренс якого клітинами печінки здійснюється повільніше, ніж вільного ТАП.
(1 votes, average: 5.00 out of 5)