Проблеми пов’язані з визначенням активності амілази
Незважаючи на пильну увагу, яку приділяють вивченню α-амілази на протязі багатьох років, дослідження активності ферменту пов’язане з окремими труднощами: відсутністю гомогенного субстрату з певною хімічною структурою, утворенням суміші продуктів реакції, множинними механізмами реакції. В даний час в клінічній біохімії це єдиний фермент, для якого не розроблений не тільки референсний, але навіть оптимальний метод визначення активності, малодоступний стабільний матеріал для проведення зовнішнього контролю якості. Відсутність уніфікованого субстрату, різні механізми реакції і утворені продукти реакції – все це знаходить відображення у безлічі способів вираження активності ферменту (амілокластіческіе одиниці, хромогенні та ін.), Що ускладнює зіставлення даних, отриманих різними методами.
Різниця в механізмі і продуктах реакції, способі вираження активності ферменту ставить питання про порівнянності даних, отриманих різними методами. У ряді робіт встановлено, що результати визначення активності α-амілази добре корелювали один з одним, проте значення активності ферменту, визначені кожним з методів, були різними. У цьому зв’язку висловлено сумнів у ідентичності даних, отриманих в реакціях з різними механізмами дії.
Серед звичайно використовуваних методів розділення ізоферментів α-амілази слід зазначити ЕФ на різних підтримуючих середовищах, хроматографію, ізоелектричного фокусування, визначення активності з урахуванням специфічності по субстратів і інгібіторів кожного з изоферментов, иммунохимические методи.
Α-Амілаза – стабільний фермент, активність якого не змінюється при зберіганні при 20 ° С протягом тижня і при 4 ° С протягом місяця. Зберігання проб сироватки крові при -20 ° С протягом 3 міс при неодноразових заморожування і відтавання не змінює спектр ізоферментів. Зміни істинного розподілу фракцій амілази можуть відбуватися, якщо процедуру ЕФ проводять при 37 ° С протягом кількох годин. Небажана також тривала інкубація при 37 ° С при визначенні низької активності ферменту.
Особливі проблеми пов’язані із зберіганням проб сечі. Відомо, що амілаза швидко інактивується при рН нижче 5,0, тому рекомендовано збирати сечу в буфер при рН 7,0. Однак якщо сеча знаходиться в сечовому міхурі хоча б деякий час, фермент буде инактивирован кислої сечею. Сумнівно також, чи зможе фермент уникнути розпаду в дуже кислому сечі, перед тим як покине нирки. Вплив сечі з низьким рН на активність ферменту необхідно враховувати при дослідженні відносин кліренс амілази і креатиніну, проведеному у хворих з порушеною функцією нирок.
Related posts:
- Методи визначення активності креатинкінази Фермент КК каталізує оборотне фосфорилування креатину і АДФ згідно реакції: Аналітичні методи, використовувані в клінічній біохімії для визначення активності КК, можуть бути засновані як на прямій, так і на зворотної реакції. В ході реакції можна визначити кількість креатину або концентрацію креатинфосфату. Першими методами визначення активності КК були методи кінцевої точки; в даний час домінують кінетичні […]...
- Методи визначення активності ГГТ В даний час при визначенні активності ГГТ в якості акцептора глутамілової групи використовують гліцінгліцін: оптимальна концентрація його пригнічує реакцію гідролізу, але не транспептідаціі. В якості донора глутамілового радикала запропоновано использоватьмногиесоединения:N-γ-глутамил-аминопроприонитрил, Γ-L-глутаміл-β-нафтіламід, N – (DL-γ-глутаміл) – анілін і L-γ-глутаміл-р-нітроанілін (glu-PA). Широке застосування знайшло останнім з’єднання, для виявлення фарбування якого не потрібно додаткових реакцій. Крім того, коефіцієнт […]...
- Методи визначення активності лактатдегідрогенази Основний метод визначення активності ЛДГ – вимірювання оптичної щільності НАДН при довжині хвилі 340 нм. Вибір для практичних цілей реакції перетворення пірувату в лактат пояснюється тим, що внаслідок високого спорідненості ЛДГ до пирувату максимальна швидкість цієї реакції в три рази вище, ніж освіта пірувату з лактату. У випадку прямої реакції аналітичні труднощі пов’язані з підбором […]...
- Номенклатура ферментів У 1961 р спеціальною комісією Міжнародного біохімічного союзу була запропонована систематична номенклатура ферментів. Згідно їй ферменти були поділені на шість груп відповідно до загальним типом реакції, яку вони каталізують. Кожен фермент при цьому отримав систематичне назва, точно описує каталізується їм реакцію. Однак, оскільки багато з цих систематичних назв виявилися дуже довгими і складними, кожному ферменту […]...
- Аналіз нейронної активності в процесі мислення Мабуть, пряме зіставлення розумових операцій людини з імпульсною активністю нейронів може дати самий безпосередній відповідь на питання, що відбувається в мозку в процесі вирішення проблеми. Проте можливості подібної роботи на мозку пов’язані з вирішенням етичних проблем, з одного боку, і обмеженим числом електродів, які можуть бути введені в мозок людини, – з іншого. В даний […]...
- Лужна фосфатаза Лужна фосфатаза (ЛФ) – фосфогідролаза моноефіри ортофосфорної кислоти (КФ 3.1.3.1) – гідролізує різні синтетичні субстрати при оптимумі рН, рівному 10,0; субстрат ферменту in vivo точно не відомий. ЩФ – глікопротеїн; за структурою це димер з уявною значною варіацією молекулярної маси ферменту в різних тканинах. ЩФ – метало-фермент, до складу активного центру ферменту входить атом цинку. […]...
- Трансамінування і дезамініровання У ході деградації білків накопичується амінний азот, який на відміну від вуглецю не придатний для отримання енергії за рахунок окислення. Тому ті аміногрупи, які не можуть бути повторно використані для біосинтезу, перетворюються на сечовину (див. С. 184) і виводяться з організму. А. Трансамінування і дезаминирование З реакції перенесення NH2 найбільш важливі реакції трансамінування (1). Вони […]...
- Регуляція активності генів У еукаріотів розмір генома в сотні, а у ссавців в тисячу разів більше, ніж у прокаріотів, тому регулювати таку систему досить складно. У більшості еукаріотів регуляція активності генів здійснюється на стадії транскрипції. Для них характерні довгоживучі матриці іРНК. Хоча у еукаріотів після введення субстрату синтез певних ферментів посилюється, проте це посилення не настільки велика, як […]...
- Глюкоза сечі Як правило, в нормі глюкоза не міститься в сечі, тому урінарний глюкотест є одним з найпоширеніших методів скринінгового аналізу в поліклініках і стаціонарах. Глюкозурия спостерігається у пацієнтів при перевищенні рівня глюкози в крові 10 ммоль / л. Необхідно враховувати, що у окремих здорових індивідуумів з низьким нирковим порогом для глюкози може спостерігатися глюкозурія без наявності […]...
- Імуноферментний метод або аналіз ІФА – найбільш поширений сучасний метод, який використовується для діагностики вірусних, бактеріальних, протозойних інфекцій, зокрема для діагностики ВІЛ-інфекції, вірусних гепатитів та ін. Модифікацій ІФА дуже багато. Широко використовується твердофазний неконкурентний варіант ІФА. Його проводять у 96-лункових полістиролових планшетах (тверда фаза). При проведенні реакції необхідно на кожному етапі відмивати прореагували компоненти. При визначенні антитіл у лунки, […]...
- Регуляція активності в рослині Відкривання і закривання продихів регулюється декількома механізмами. 1. 1. Зміна тургору замикаючих клітин. Замикаючі клітини продихів мають неоднорідні клітинні стінки. Клітинна стінка, яка ближче до устьичной щілини товщі, ніж протилежна стінка. Целюлозні волокна розташовуються в ній так, що ця стінка менш еластична. У міру того, як клітина поглинає воду, тонка і еластична частина клітинної стінки, […]...
- Інструментальні складники розвитку пізнавальної активності учнів Н. Дига, Кандидат педагогічних наук, доцент Переяслав-Хмельницький Важливим завданням сучасного вчителя є постійне удосконалення інструментальних складників розвитку пізнавальної активності учнів, зокрема в процесі вивчення української літератури, які б забезпечували швидке й міцне опанування навчального матеріалу школярами з урахуванням їхніх індивідуальних можливостей. Предметом особливої уваги науковців 0. Богданової, Н. Волошиної, С Гончаренка, О. Ісаєвої, М. Кудряшова, […]...
- Креатинкіназа Креатинкіназа-АТФ: креатин-N-фосфотрансферази (КФ 2.7.3.2) – каталізує оборотний перенесення фосфатного залишку між АТФ і креатином з утворенням АДФ і креатинфосфату. Загальноприйнято скорочена назва ферменту – креатинкиназа (КК). КК – цитозольний і мітохондріальний фермент, який функціонує в клітинах багатьох тканин. Продукт реакції фосфокреатин – макроергічних з’єднання, що забезпечує енергією скорочення м’язи, її розслаблення і транспорт метаболітів в […]...
- Гени і білки Відомо, що всі ферменти є білками і каталітична активність ферменту визначається його білкової частиною і додатковими кофакторами. Білки, що складаються з амінокислот, які з’єднуються між собою Аміна і карбоксильних кінцями, називаються поліпептидами. Каталітична активність ферменту залежить від кількості і типу входять до нього амінокислот, порядку їх розташування по ланцюгу, кількості ланцюгів і характеру їх взаємного […]...
- Фізичні і хімічні властивості сечі Сеча являє собою рідину світло-жовтого кольору. У сечі міститься 95% води і 5% твердих речовин. Це сечовина (2%), сечова кислота (0,05%), креатинін (0,075%) та інші речовини, в тому числі солі калію, натрію. Протягом доби з організму з сечею виводиться 25 – 30 г сечовини і до 25 г неорганічних речовин. При захворюваннях нирок, при короткочасних […]...
- Утвердження громадської активності трудівника – IІ варіант – 8 клас – СТЕПАН РУДАНСЬКИЙ Творчість С. Руданського в українській літературі посідає важливе місце. Його творча спадщина велика і багатогранна, але найвиразніше його талант проявляється в ліриці. Щодо своїх ліричних творів Руданський вживав жанрове визначення “пісні”. І це не випадково. Впадає в око близькість лірики українського поета до фольклору. Але все рівно він не вдавався до стилізації під народну творчість, […]...
- Самостійна робота як шлях розвитку пізнавальної активності учнів на уроках літератури Н. Дига, Старший викладач Переяслав-Хмельницького державного педуніверситету ім. Григорія Сковороди Навчання – це процес інтелектуального й духовного розвитку особистості. Як відомо, характер і ступінь навчальної діяльності учнів можуть бути різними. Щоб навчальний процес був успішним, треба розвивати пізнавальну активність школярів. А це свідомий процес здобуття знань, перетворення знань у переконання, розвиток інтересу до навчальної діяльності, […]...
- Визначення температури по спектру З фізичної точки зору температура є характеристикою кінетичної енергії молекули речовини, а зовсім не результатом її вимірювання. Температура визначає властивості речовини, тому є однією з найважливіших фізичних характеристик. Визначення температури небесних об’єктів – одна з пріоритетних задач астрофізики. Разом з тим вона є однією з найскладніших. Визначити температуру об’єктів, розташованих на відстані мільйонів і мільярдів […]...
- Механізм дії ферментів Провідну роль у механізмі ферментативного каталізу відіграє освіта фермент-субстратні комплексів, на існування яких було вказано в 1902 р (Д. Браун). – На першій фазі ферментативного каталізу між субстратом і ферментом виникає з’єднання, в якому реагенти пов’язані один з одним іонної, ковалентного чи іншого виду зв’язком. – Потім друга фаза – субстрат під дією приєднаного до […]...
- Дегідрогенази кетокислот У проміжному метаболізмі є Мультиферментні комплекси, каталізують складну багатостадійну реакцію окисного декарбоксилювання 2-кетокислот і перенесення утворюється ацильного залишку на кофермент А. В якості акцептора електронів виступає НАД +. Крім того, в реакції беруть участь тіаміндифосфат, ліпоамід і ФАД. До дегідрогенази кетокислот відносяться: а) піруватдегідрогеназний комплекс (ПДГ, піруват → ацетил-КоА), б) 2-оксоглутаратдегідротеназний комплекс цитратного циклу (ОГД, […]...
- Нервова регуляція активності нейронів дихального центру Нервова регуляція здійснюється в основному рефлекторними шляхами. Виділяють дві групи впливів: епізодичні та постійні. До постійних відносяться три види: 1) від периферичних хеморецепторів серцево-судинної системи (рефлекс Гейманса); 2) від пропріорецепторов дихальних м’язів; 3) від нервових закінчень розтягувань легеневої тканини. У процесі дихання м’язи скорочуються і розслабляються. Імпульси від пропріорецепторов надходять в ЦНС одночасно до рухових […]...
- Система Р450 На першій фазі біотрансформації менш реакційноздатні сполуки піддаються ферментативному гідроксилированню. Така модифікація робить можливою подальшу кон’югацію з полярним речовиною (див. С. 308). Взагалі гідроксилюється ферменти є монооксигенази, що включають як кофермент железосодержащий гем (див. С. 108). Відновлена форма гема пов’язує оксид вуглецю (СО) і набуває характерне поглинання світла при 450 нм. Тому така група ферментів […]...
- Класифікація хімічних реакцій за зміни ступеня окислення елементів За зміною ступеня окислення елементів хімічні реакції ділять на окислювально-відновні реакції, і реакції, що йдуть без зміни ступенів окислення хімічних елементів. Окислювально-відновні реакції (ОВР) – це реакції, в ході яких ступеня окислення речовин змінюються. При цьому відбувається обмін електронами. У неорганічній хімії до таких реакцій відносяться, як правило, реакції розкладання, заміщення, з’єднання, і все реакції, […]...
- Травлення в порожнині рота людини У порожнині рота починається механічна і хімічна переробка їжі. Тут їжа перебуває 15-20 с, протягом яких вона подрібнюється, змочується слиною і формується харчова грудка. Слинні залози виділяють на добу від 0,5 до 2 л слини, що складається з води (до 95%), солей, ферментів (амілази і мальтази), слизу і бактерицидного речовини (лізоциму). У новонароджених слинні залози […]...
- Утвердження громадської активності трудівника – I варіант – 8 клас – СТЕПАН РУДАНСЬКИЙ У Ялті є могила з рожевого мармуру. Тут спить вічним сном Степан Руданський – добра інтелігентна людина, справжній лікар, дотепний сатирик, цікавий ліричний поет. У творчім доробку Руданського – співомовки, приказки, пісні. Твори поета різні, але всі вони мають народнопоетичну основу. Герої творів Руданського – прості працьовиті люди. Знедолені від народження, вони наділені і розумом, […]...
- Патологічні зміни складу сечі Вивчення складу сечі може дати дуже цінні відомості про процеси, що відбуваються в організмі при обміні білків, жирів і вуглеводів, про мінеральному обміні, про дію лікарських та отруйних речовин, що вводяться в організм, і т. д. Особливо велике значення дослідження сечі для діагностики та лікування захворювань. Так, наприклад, присутність білка або цукру в сечі свідчить […]...
- Життєдіяльність і розмноження клітин Клітини рослин, тварин і людей мають багато спільного. Це найскладніші хімічні лабораторії, в яких відбувається безліч перетворень. Більшість з них здійснюють білки-каталізатори, або ферменти. Каталізатор – це речовина, здатна в тисячі разів прискорювати реакцію, маса якого до і після реакції практично не змінюється, каталізатор бере участь лише в проміжних реакціях і в кінці звільняється повністю. […]...
- Коротка характеристика ферментів Ферменти (біологічні каталізатори) – це речовини, невеликі кількості яких змінюють швидкість і склад кінцевих продуктів біохімічних реакцій, що протікають в живих організмах. Біологічні каталізатори, як і неорганічні каталізатори, в результаті реакції залишаються хімічно незмінними, а в процесі реакції зазнають змін, утворюючи з субстратом (речовинами, що вступають в реакцію) проміжний активоване комплекс. Ферменти, на відміну від […]...
- Епітеліальні клітини Альдостерон виробляється в клубочкової зоні кори надниркових залоз, діє на епітеліальні клітини дистальних відділів нефрона і збірних трубочок, викликає збільшення реабсорбції іонів Na + води і підвищення секреції іонів К + (або іонів Н + при їх надмірному вмісті в організмі). Альдостерон є частиною ренінангіотензін-альдостеронової системи (функції якої розглянуті раніше). Обсяг сечі, що виділяється при […]...
- Слина, її склад і травна дія Слина – безбарвна, злегка опалесцююча, легко піниться, що тягнеться в нитки рідина без запаху і смаку, лужної реакції. Лужність її коливається у різних людей і у одного і того ж людини протягом дня (рН 5,25-7,54). Слина може бути і кислої, особливо після прийому їжі. Реакція слини та її склад у тварин відрізняються від слини людини. […]...
- Проблеми ризик-менеджменту Відсутність єдиного понятійного апарату Теоретичні основи управління ризиками як наукової галузі менеджменту ще недостатньо сформовані – фахівці в цій сфері ще не виробили єдиного підходу до визначення багатьох понять і термінів. Навіть ключові поняття ризику і ризик-менеджменту не завжди визначаються однаково, а більш дрібні, похідні терміни часто викликають суперечки і розбіжності через непорозуміння змісту. Ризик-менеджментом […]...
- Радіоактивність: види, одиниці Мимовільне перетворення нестійкого ізотопу одного хімічного елемента в ізотоп іншого елемента, при якому відбувається випускання елементарних частинок, називається радіоактивністю. Якщо нам відома одна з частинок, що вийшла при розпаді, то можна обчислити і іншу частку, оскільки під час ядреной реакції дотримується, так званий, баланс мас ядерної реакції. Суть ядерної реакції схематично можна виразити так: Реагенти, […]...
- Значення КК-МВ Ізофермент КК-МВ специфічний для міокарда не тому, що в інших тканинах такого ізоферменту немає, а тому, що в кардіоміоцитах його активність становить 15-42% загальної активності КК, в той час як в тканини скелетних м’язів його зміст не перевищує 4%, та й то тільки в червоних, повільно скорочуються м’язових волокнах. У цих умовах при ураженні міокарда […]...
- Рішення проблеми вимирання видів Охорона середовища існування – ключ до захисту рідкісних, що знаходяться під загрозою зникнення і вимираючих організмів. Вид не може вижити без місця проживання, тому головним пріоритетом в його захист є збереження природного середовища мешкання. Захист довкілля може бути здійснена різними способами: По-перше, необхідно визначити, де знаходяться зникаючі види. Це здійснюється сьогодні органами державної влади та […]...
- Екологічні проблеми річки Ніл Мабуть, найголовніша екологічна проблема річки Ніл – це перенаселення країн, розташованих на річці. Життя населення цих країн, повністю залежить від Нілу. З кожним роком потреби людей ростуть. Річка забезпечує народ водними і електричними ресурсами. Багато війн, в минулі часи велися через нафту, в сучасному ж світі вони можуть вестися через води. Саме Ніл – велика […]...
- Обмін речовин в організмі – конспект Обмін речовин в організмі являє собою сукупність всіх хімічних реакцій, що відбуваються в ньому. Хімічні реакції, пов’язані з перетворенням речовин, відносять до двох процесів – пластичного і енергетичного обміну. Пластичний обмін – це сукупність реакцій синтезу органічних речовин в клітині з використанням енергії. Енергетичний обмін – це розпад отриманих з їжею поживних речовин до простих […]...
- Сучасні екологічні проблеми – реферат Якщо навколишнє середовище змінюється на стільки, що умови проживання людини погіршується, то це прийнято вважати екологічними проблемами. Практично всі екологічні проблеми мають масштабний характер, тобто присутні по всій земній кулі. А це означає, що вони загрожують не окремому регіону або країні, а всій планеті і людству в цілому. Причиною екологічної проблеми може бути стихійне лихо. […]...
- Видільна система – коротко Видільна система – система різних органів, які забезпечують виведення з організму відпрацьованих продуктів метаболізму. До видільної системи відносять органи сечовидільної системи, легені, шкіру. Сечовидільні органи – органи, що забезпечують утворення сечі, її збирання та виведення їх організму людини. До органів сечовидільної системи відносять нирки, сечоводи, сечовий міхур, сечівник. Нирка – парний орган, основною функцією якого […]...
- Травні ферменти: що це таке? Майже завжди, коли мова заходить про травлення, ми поспішаємо в будь-якому місці ставити цей термін, маючи на увазі під ним щось речовину, здатну перетравлювати їжу, то якісь універсальні вітаміни. Багато чого… Але про те, яку роль виконують травні ферменти, більшість з нас не знає. А даремно! Коротке визначення ферментів Говорячи простою, ненауковим мовою, ферменти – […]...
- Проблеми продажів по каталогах Як і в будь-який інший сфері діяльності, у бізнесі дистанційних продажів є проблемні моменти. Одним з таких моментів є нечесні бізнесмени, які ошукують споживачів і викликають тим самим недовіру до продажів по каталогах в принципі. Нерідко під виглядом розіграшів призів із споживачів просто витягують гроші. “Унікальні пропозиції” та “неповторні можливості” насправді виявляються порожніми обіцянками з […]...