Діагностика малярії

Як приклад використання ДНК-зондів для діагностики захворювань можна привести процедуру виявлення Plasmodium falciparum. Цей паразит викликає малярію, захворювання, загрозливе приблизно третини всього населення Землі. Він інфікує еритроцити і руйнуй їх, що призводить до розвитку лихоманки, а у важких випадках – до поразки мозку, нирок та інших органів. Щоб виявити джерела інфекції, оцінити ефективність заходів щодо їх ліквідації та забезпечити ранню діагностику та лікування, необхідні досить чутливі, прості й недорогі методи. В даний час малярію діагностують за допомогою мікроскопічного дослідження мазків крові – ефективного, але трудомісткого і займає багато часу процесу. Імунологічні методи виявлення Plasmodium, такі як ELISA, досить швидкі і їх легко автоматизувати, але з їх допомогою не можна відрізнити, поточну інфекцію від минулої, оскільки при цьому визначається тільки наявність Антел до Plasmodium в крові хворих.

Для виборчої ДНК-діагностики поточної інфекції, т. Е. Для виявлення ДНК збудника, в якості основи використовуються високоповторяющіеся послідовності ДНК P. falciparum. Спочатку за допомогою ДНК-зонд, проводиться скринінг бібліотеки геномної ДНК паразита. Потім відбираються клони, що дають найбільш інтенсивний гібрідізаціонний сигнал, оскільки саме вони імовірно містять високоповторяющіеся послідовності. ДНК кожного з відібраних клонів перевіряють на здатність до гібридизації з ДНК видів Plasmodium, що не викликають малярію. Як специфічного зонда вибирається послідовність, гібридизується з ДНК P. falciparum, але не з ДНК P. vivax, P. cynomolgi або з ДНК людини. З його допомогою можна виявляти всього 10 пг очищеної ДНК P. falciparum або 1 нг тієї ж ДНК в крові хворого. Отримано та охарактеризовано понад 100 різних ДНК-зондів, що дозволяють виявляти патогенні штами різних бактерій, вірусів і паразитичних найпростіших. Так, є зонди для діагностики бактеріальних інфекцій людини, що викликаються Legionella рпеіmophila (респіраторні захворювання), Salmonella typhi (харчові отруєння), Campylobacter hyoinrestinalis (гастрити), а також для виявлення ентеротоксічного штаму Escherichia coll (гастроентериту). Однак це лише “верхівка айсберга”; в принципі за допомогою гібридизації можна виявляти практично будь патогенні мікроорганізми.


1 Star2 Stars3 Stars4 Stars5 Stars (1 votes, average: 5.00 out of 5)

Діагностика малярії