Трансгенні сільськогосподарські тварини
Спільно з колегами зі Східної Німеччини були проведені експерименти по мікроін’єкції ГГР бика під контролем промотора MMTV в зиготи великої рогатої худоби з використанням проміжних реципієнтів. Ці експерименти стали однією з перших спроб роботи зі зміни генотипу великих с / г тварин. В результаті в одного з народжених тварин було доведено наявність чужорідної ДНК. Однак трансгени був перебудований і містив у своєму складі тільки LTR MMTV і послідовності плазмідної вектора.
Спроби перенесення ГГР бика, овець, людини, гена рилізинг-фактора гормону росту людини (вихід гормону росту в кров знаходився під контролем ендогенних регуляторів) в подальшому були продовжені на зиготах овець, свиней, кролів і рибах як в нашій країні, так і за кордоном.
Трансгеноз відкрив нові шляхи спрямованого зміни продуктивності різних видів с / г тварин (підвищення темпів зростання, зміна кількості і якості молока, вовни, збільшення плодючості), отримання тварин-біореакторів цінних біологічно активних препаратів (таких як фактор згортання крові, антитрипсин, гемоглобін і антитіла в молоці, крові або сечі), створення нових форм і порід тварин, пристосованих до біомедичних досліджень, які можуть бути джерелами органів для ксенотрансплантації, порід, стійких до різних захворювань. Зокрема, з успіхом для спрямованої експресії фармакологічних білків використовуються гени, що кодують основні білки молока – казенні. У Росії, наприклад, були отримані трансгенні миші, які експресують в молоко цінний медичний препарат – інтерферон людини (600 мкг інтерферону на 1 мл молока).
В одному з наших експериментів гени хлорамфеніколацетілтрансферази Е. coli і гормону росту бика були підставлені під контроль 5-області гена казеїну. Однак аналіз експресії трансгени у отриманих нами трансгенних мишей показав, що обрана послідовність 5-області гена казеїну не забезпечувала активної експресії в епітеліальних клітинах молочної залози. Одним з генів, що мають фармакологічну цінність, є ген, що кодує гранулоціт-колоній-стимулюючий фактор (Г-КСФ) людини. В даний час з нашою участю ведуться дослідження з аналізу експресії гена Г-КСФ, що знаходиться під контролем промотора і 3′-фланкирующей області гена ае-казеїну бика (Дворянчиков і ін., 2000) в молоці отриманих нами трансгенних мишей (робота проводиться спільно з дослідниками державного університету м Ріо-де-Жанейро, Бразилія). Методом імуноферментного аналізу у трансгенних самок в лактирующей молочній залозі виявлений рекомбінантний білок на рівні 0,1-0,3 мкг в мл. Були проведені тести на біологічну активність білка в молоці трансгенних мишей за допомогою Г-КСФ-залежною мієлоїдній лінії клітин мишей, первинної культури кісткового мозку мишей і людини в агарі. Обидва тести виявили стимулюючу активність молока в розведенні, відповідної концентрації 1-2 пкг / мл рекомбінантного білка. Передбачається, що дана генетична конструкція і її модифікації можуть бути використані для отримання трансгенних кіз, в молоці яких буде експресуватися лікарський білок.
Разом з тим з самого початку робіт по трансгенозу були виявлені деякі складності, пов’язані з цією технологією. В першу чергу процедура отримання трансгенних тварин поки що залишається малоефективною. Трансгенні тварини часто менш життєздатні, ніж природні особини. Є проблеми і зі стабільністю експресії трансгени. Все це, а також ряд інших причин, включаючи насторожене ставлення громадськості до даної проблеми, і зумовили ту ситуацію, що до сих пір трансгенні тварини (на відміну від трансгенних рослин) знаходять поки лише обмежене застосування в практиці.
(1 votes, average: 5.00 out of 5)